磁盘空间不足。 磁盘空间不足。 操作高效液相色谱仪的过程中可能遇到多种多样的问题
首页 > 新闻资讯 > 行业新闻 > 操作高效液相色谱仪的过程中可能遇到多种多样的问题

新闻资讯

操作高效液相色谱仪的过程中可能遇到多种多样的问题

* 来源: * 作者: * 发表时间: 2021-11-25 5:57:53 * 浏览: 176

光谱仪普通液相的操作规程也是有操作人员起草的,所以只需严厉依照操作请求停止操作,普通不会呈现问题,当然啫喱需求特别指出的是关于液相的日常维护颐养很重要,比方活动相的过滤、脱气、泵密封垫的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等,假使不坚持,很容易招致色谱柱梗塞、系统压力过大、色谱峰异常等不用要的毛病,糜费时间其次,操作人员在配制液相剖析用样品溶液时,最好由同一个人单独完成,以免不用要的偶尔误差。4.液相装置环境:液相色谱仪应尽量装置于程度、远离振动、电磁干扰的屋内的台面上,有条件的话尽量将液相数据处置系统分隔开,一个是避免色谱基线噪音偏大,基线不稳等,一个是为减少对人体的危害。各位小伙伴在实验分析中应该都遇到过这类问题,在液相色谱中,对于组分复杂的样品,采用一种色谱体系,往往很难得到理想的分离效果,要么分离时间太长,要么分离度太差。这种情况,采用梯度洗脱就可以缩短分析时间,提高分离效果。下面和大家分享一则梯度微调实例,一起感受下梯度微调对分离效果的奇妙影响吧。1、尽量在能长时间测试该项目的仪器上开发方法;2、需要了解系统的性能,避免出现仪器系统改变后不能重现的问题;3、要知道系统的两个基本情况:梯度滞后体积和比例精确性。这可以在同一个实验里得到这两个数据:参考《JJG7052014液相色谱仪检定规程》中《梯度误差》实验:在B溶液(0.1%丙酮)后加紫外检测器,设置一个多阶层的梯度,B溶液以5%的幅度从0%变到100%,流速与平常一样,流速为1mL/min。每段梯度大概保持5min。然后接二通运行梯度,记录图谱。每段梯度设置的时间与实际发生的梯度时间之差就是梯度延迟时间,阶层的高度可以用来测量流动相比例,这些阶层可能有点模糊,是由系统中混合体积造成的;4、检测完系统,就可以按照它的性能来设计方法。

定硫仪一支注射器暂时不用时(比如下班),更要彻底清洗,否则残留在其中的样品可能将针芯粘牢,造成注射器报废使用自动进样器的用户也应注意此问题,zui好是经常更换和清洗注射器。定期检查并清洗进样口衬管仪器长期使用后,会发现衬管内积有焦油状物质,这是样品中不挥发成分造成的。此外还有颗粒状物质积存(隔垫碎屑,样品中的固体物质),这些都会干扰分析的正常进行。因此要定期检查,及时清洗。注意衬管中填充一些经硅烷化处理的石英玻璃毛,即可提高样品的汽化效率,又能防止隔垫碎屑进入色谱柱造成堵塞。保留完整的仪器使用记录这是仪器的履历,应逐日记录,包括操作者、分析样品及条件、仪器工作状态等等。一旦仪器出现问题,这是查找原因的重要资料。工厂企业往往有严格的操作程序,这方面要做的好一些。有一些实验室有时不太注意这个问题,实在不是一个好的习惯。更换零部件要逐一进行修理仪器时,不要一次更换多个部件,那样会造成故障原因的判断失误。

甲烷分析仪从目前的售价看,四元低压的泵比二元高压的并低不了太多,但他们节约的成本是不少的四元低压梯度系统采用单泵加梯度比例阀来实现,因为比例阀是在泵前的,并且各流路的溶剂在比例阀里就混合在一起了,所以是泵前、低压混合。一般地,对于常规分析来说,四元低压梯度也可以满足需要;如果分析样品成份复杂、对重现性要求较高,或者需要在低流量下进行梯度分析,还是选择高压梯度好一些。当然,现在美国SSI(LabAlliance)公司推出的四元高压梯度泵,在保证高精度分析的同时,也解决了流动相数量受限制问题。液相色谱从性能上比较,四元高压肯定优于四元低压。四元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的,通常泵的流速都是很准的,所以混合的精度也是很高的。四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的,理论上混合的比例也是准确的,但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟,无论它动作多么快,总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合,在单位时间内,A路和B路的电磁阀各开通50%的时间,这时问题不大,电磁阀的延迟影响可以通过调整补偿系数来尽量弥补。但是如果极端一点的情况,A路99%,B路1%,这种情况下单位时间内,A路的电磁阀开通99%的时间,B路只占1%,时间是很短的,这时B路电磁阀的延迟就影响很大了,甚至可能延迟的时间比工作的时间还要长。这是两个管路的情况,假如四个管路同时工作,其结果可想而知。高压梯度就不会存在这种问题了。

金属过滤器检查进样口、注射器、垫圈和色谱柱都正常,可就是不出峰,无意中发现进样口柱头压达不到设定值,总是偏高,这时才怀疑是ECD检验器出口不畅通由于ECD的排放物有一定的放射性,所以ECD出口是引到室外的。当时是秋冬之交,雨水进入到ECD排出口之后冻住了,因此造成仪器ECD的出口堵塞,柱头压居高不下,气体在气路中无法流动,也就无法载样品到检测器,所以不出峰。安捷伦气相色谱仪7890B  二、基线问题  气相色谱仪基线波动、飘移都是基线问题,基线问题可使测量误差增大,有时甚至会导致仪器无法正常使用。  1、遇到基线问题时应先检查仪器条件是否有改变,近期是否新换气瓶及设备配件。  2、如果有更换或条件有改变,则要先检查基线问题是不是由这些改变造成的,一般来说,这种变化往往是产生基线问题的原因。有些人在工作中就遇到过这种情形:新载气纯度不够,换过载气之后,基线逐渐上升(由于载气净化管的原因,基线不是马上变化的)。第二天开机之后,基线非常高,并伴有基线强烈抖动,所有峰都湮没在噪音中,无法检测。经过检查,问题出现在新换的载气上,重新更换载气后,立即恢复了正常。  3、当排除了以上可能造成基线问题的原因后,则应当检查进样垫是否老化(应养成定期更换进样垫的好习惯);  4、石英棉是不是该更换了;  5、衬管是否清洁。值得一提的是,清洗衬管时可先用试验zui后定容的溶剂充分浸泡,再用超声波清洗几分钟,然后放入高温炉中加热到比工作温度略高的温度,zui后再重新安装。

高效金属过滤器操作高效液相色谱仪的过程中可能遇到多种多样的问题,遇到问题不可怕,主要在于我们如何分析解决问题,下面滕海仪器分享几组高效液相色谱仪常见故障的处理操作液相色谱仪可能遇到压力波动大,峰分叉的现象,这种现象是由于系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,使两者不能密封,这时我们需要注意观察流动相的量,保证不锈钢氯气沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气,如果是单向阀与阀座之间有异物就得拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。当液相色谱仪出现既无压力指示也没有液体流过该怎么办呢?我们首先分析原因,出现这一现象无非两种原因:大量气泡进入泵体或者泵密封垫圈磨损。如果是种情况,在泵作用的同时,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处帮助抽出空气;如果是第二种情况则需要更换密封垫圈。。

当流动相中含有缓冲盐时则过滤是必要的如前所述当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异夏季一般不超过48h冬季一般不超过一周)后在使用前还应重新过滤所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系二者不可混用以防止滤膜溶解而造成污染。装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换以避免滤器因过载而起不到过滤作用。3.净化样品当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分如产生永久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。4.避免过高柱压虽然高效液相色谱柱能耐受的压力可达6psi(磅/平方英寸)但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命避免的方法是(1)柱压过高时尽可能采用较小的流速以不超过柱最大允许压力的一半为宜。(2)当流速较大时应采取流速梯度的办法使流速分步到位。(3)使用手动进样阀时进样阀的切换要尽可能的快。否则超过2%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时柱切换要避免在高压下进行。

色谱柱每米降压为75Kg/cm2以上高速——流速为0.1~10.0ml/min。高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:?速度快——通常分析一个样品在15~30min,有些样品甚至在5min内即可完成。分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

  3、FID的灵敏度与氢气、空气和氮气的比例有直接的关系,因此要注意优化一般三者的比例接近或等于1:10:1,如氢气30~40ml/min,空气300~400ml/min,氮气30~40ml/min。另外,有些仪器设计有不同的喷嘴分别用于填充柱和毛细柱,使用时要查看说明书。  4、为防止检测器被污染,检测器温度设置不应底于色谱柱实际工作的高温度。一旦检测器被污染,轻则灵敏度下降或噪声增大,重则点不着火。消除污染的办法是清洗,主要是清洗喷嘴表面和气路管道。具体办法是拆下喷嘴,依次用不同的溶剂(丙酮、lv仿和乙醇)浸泡,并在超声波水浴中超声10min以上。还可用细不锈钢丝穿过喷嘴中间的孔,或用酒精灯烧掉喷嘴内的油状物,以达到彻底清洗的目的。有时使用时间长了,喷嘴表面会积碳(一层黑色的沉积物),这会影响灵敏度。可用细纱纸轻轻打磨表面除去。清洗之后将喷嘴烘干,再装在检测器是进行测定。

2.进样系统包括进样器、各种进样口和气化室,样品由进样器注入气化室,在气化室高温作用下瞬间气化,然后在载气的携带下进入与气化室相连的色谱柱中3.分离系统分离系统由色谱柱组成,它是色谱仪的核心部件,其作用是分离样品,色谱柱主要有两类:填充柱和毛细管柱。色谱柱由色谱柱管、柱内填充物等组成。柱管一般采用金属管或玻璃管,色谱柱在恒温柱箱内工作。4.控制系统控制系统主要的任务有:控制所有的温度及时间程序、控制各种检测器((FIDNPD和FPD)的自动点火、色谱图的保存与再处理、样品分析条件的保存、程序升温、开/关检测器、分渝不分流进样器的时间等。5.检测和数据处理系统样品经过色谱柱分离后,各成分按保留时间不同,顺序地随载气进入检测器,检测器把进入的组分按时间及其浓度或质量的变化,转化成易于测量的电信号,经过必要的放大传递给记录仪或工作站,后得到该混和样品的色谱流出曲线及定性、定量曲线,即色谱图。所使用的检测器主要有以下几种:火焰离子化检测器FID(FlameIonizationDetector)、热导检测器TCD(ThermalConductivityDetector)、电子俘获检测器ECD(ElectronCaptureDetector)氮磷检测器NPD(NitrogenPhosphorDetector)、火焰光度检测器FPD(FlamePhotometricDetector)、质谱检测器MSD(MassSpectrometryDetector),本文主要介绍TCD和FID两种检测器(1)热导检测器TCD(ThermalConductivityDetector),其基本原理是每种物质都有导热能力,而且导热的能力大小不同,通过一个热敏电阻来测定与热敏电阻接触的气体组成变化情况。这种检测方式虽然不是灵敏的,但是对所有样品都有响应,是通用型的检测器。(2)火焰离子化检测器FID(FlameIonizationDetector)一般用的是氢火焰,其原理是在氢气燃烧时,在火焰的上方会有一个温度很高的区域,样品在这个区域被离子化,形成一些正负离子,在火焰的周围加上一个电场,让离子定向移动,形成电流,经过一系列放大后得到放大信号,也就是检测到的信号。FID只对有机化合物有响应,为选择性的检测器。但是它的灵敏度较高,应用为广泛,一般仪器上都是配双柱双气路双检测器,单柱抗干扰能力差,稳定时间长,双柱的干扰一正一负正好抵消。

安装新的密封圈后,进行zui初的ldquo,磨合期在至少350bar的反压下泵入异丙醇15-30分钟。这要通过使用原来的色谱柱或阴尼管线来产成压力.。杭州森尼欧提供液相色谱仪色谱柱的选择指南  现代液相色谱仪色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。一、硅胶基质填料:1、正相色谱  正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其它具有极性官能团如胺基团(NH2APS)和氰基团(CNCPS)的键合相填料。  由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其它极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组份的极性大小,即极性较弱的组份zui先被冲洗出色谱柱。  正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正己烷(Hexane)、氯仿(Chloroform)、二氯甲烷(MethyleneChloride)等。2、反相色谱  反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。  样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份zui先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。